O hnRNPA2B1 associado ao recrutamento de RNA em exossomos desempenha um papel fundamental na liberação de HSV-1 a partir de células infectadas.

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PMID:
    
            
                    J Virol. 2020 Apr 15. Epub 2020 Apr 15. PMID: 32295924
        

      Título do resumo:
    
            
                    O hnRNPA2B1 associado ao recrutamento de RNA em exossomos desempenha um papel fundamental na liberação de HSV-1 a partir de células infectadas.
        

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      Resumo:
    
            
                    hnRNPA2B1, foi relatado que uma proteína celular abundante recruta RNAs portadores de uma sequência específica (motivo EXO) em exossomos. Caracterizamos uma população de exossomos com média de 100 +/- 50 nm de diâmetro e contendo um conjunto definido de marcadores constitutivos de exossomos. Essa população compacta os miRNAs e pode ser direcionada para bloquear a expressão gênica direcionada de uma maneira dependente da dose. Os objetivos desses estudos foram caracterizar seu papel no recrutamento de miRNA. Relatamos 4 descobertas principais (i) hnRNPA2B1 não é um componente de exossomos produzidos em células HEp-2 ou HEK293T. Portanto, o hnRNPA2B1 carrega sua carga no máximo para o local da montagem do exossomo, mas ele próprio não é incorporado nos exossomos. (ii) A acumulação de exossomos produzidos por células nas quais o gene que codifica hnRNPA2B1 foi nocauteado (ΔhnRNPA2B1) foi reduzida em três vezes. (iii) Nas células HEp-2 não infectadas, o hnRNPA2B1 está localizado no núcleo. Nas células infectadas com o vírus do herpes simplex 1 (HSV-1), o hnRNPA2B1 foi exportado quantitativamente para o citoplasma, pelo menos uma fração do hnRNPA2B1 foi co-localizada com um marcador de Golgi. Finalmente (iv) nas células ΔhnRNPA2B1 houve uma redução de 2 a 3 vezes no rendimento do vírus, mas uma redução significativa (> 10 vezes) no HSV-1 liberado através da superfície apical para o ambiente extracelular. A ausência de hnRNPA2B1 não teve impacto significativo na exportação basolateral de HSV-1 de células infectadas para não infectadas por contato direto célula a célula. Os resultados sugerem que o hnRNPA2B1 desempenha um papel fundamental no transporte de vírus envelopados do local de montagem para o ambiente extracelular.Neste relatório, mostramos que o hnRNPA2B1 não é um componente dos exossomos produzidos nas células HEp-2 ou HEK293T. Nas células infectadas com HSV-1, o hnRNPA2B1 foi translocado quantitativamente do núcleo para o citoplasma. Nas células AhnRNPA2B1 infectadas, o transporte do vírus dependente de Golgi da superfície apical para o meio extracelular foi significativamente reduzido. Em essência, este relatório apóia a hipótese de que o hnRNPA2B1 desempenha um papel fundamental na saída de exossomos e do HSV-1 das células infectadas.

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