Efeitos antiproliferativos e apoptóticos de proteínas de sementes negras (Nigella sativa) na linha celular de câncer de mama humano MCF-7.

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PMID:
    
            
                    BMC Complement Med Ther. 13 de janeiro de 2020; 20 (1): 5. Epub 2020 13 de janeiro. PMID: 32020890
        

      Título do resumo:
    
            
                    Efeitos antiproliferativos e apoptóticos de proteínas de sementes negras (Nigella sativa) na linha celular de câncer de mama humano MCF-7.
        

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      Abstrato:
    
            
                    FUNDAMENTO: Nigella sativa (NS), um membro da família Ranunculaceae é comumente conhecido como semente preta ou kalonji. Foi bem estudado por seu papel terapêutico em várias doenças, principalmente o câncer. A literatura está cheia de compostos bioativos das sementes NS. No entanto, poucos estudos foram relatados sobre a atividade farmacológica de proteínas. O presente estudo foi desenhado para avaliar a propriedade anticancerígena das proteínas de sementes NS na linha celular MCF-7. MÉTODOS: O extrato de sementes NS foi preparado em solução salina tamponada com fosfato (PBS) e as proteínas foram precipitadas com sulfato de amônio a 80%. As proteínas de semente em bruto foram parcialmente purificadas utilizando cromatografia de filtração em gel e os picos foram resolvidos por SDS-PAGE. O ensaio MTT foi utilizado para rastrear as proteínas brutas e os picos quanto aos seus efeitos citotóxicos na linha celular MCF-7. Os picos ativos (P1 e P4) foram ainda estudados por seu papel na modulação da expressão de genes associados à apoptose por PCR de transcrição reversa em tempo real. Para identificação das proteínas, as proteínas foram digeridas, separadas e analisadas com LC-MS / MS. A análise dos dados foi realizada utilizando ferramentas de bioinformática on-line do gene Mascot, ExPASy ProtParam e UniProt KnowBase (UniProtKB) (GO). RESULTADOS: A cromatografia de filtração em gel separou as proteínas das sementes em sete picos e o perfil de SDS-PAGE revelou a presença de várias bandas de proteínas. Entre todas as amostras de teste, P1 e P4 apresentaram um efeito inibitório dependente da dose em células MCF-7, exibindo valores de IC de 14,25 ± 0,84 e 8,05 ± 0,22 μg / ml, respectivamente. A análise da expressão gênica demonstrou a apoptose como um possível mecanismo de morte celular. Um total de 11 e 24 proteínas foram identificadas em P1 e P4, respectivamente. A maioria das proteínas identificadas está localizada no citosol, associada a processos metabólicos biológicos, e suas funções moleculares são de ligação e catálise. Os valores de hidropaticidade estavam principalmente na faixa hidrofílica. CONCLUSÃO: Nossos resultados sugerem as proteínas das sementes NS como um potencial agente terapêutico para o câncer. Para nosso conhecimento, é o primeiro estudo a relatar a propriedade anticâncer das proteínas de sementes NS.

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